KAERATERAD: Mitokondri, Carb & Rasvhappe Metaboliidid

OAT: Mitochondrial, Carb & Fatty Acid Metabolites

Metaboolne Analüüs Profiil konkreetselt testib orgaaniliste hapete – ühendid uriiniga, mis on toodetud igapäevasel ainevahetust.

See profiil hindab Põhiline metaboolne piirkonna, mis võib olla ohustatud ühisel elustiili ja toitumistegurid nagu toitainete puudus, toksilisus, bakterite ülekasvamist või ainetoimete.

Orgaanilised happed testimine võib märkida funktsionaalne vajadus konkreetsete toitainete, dieedimuutustele, antioksüdant kaitse, võõrutus, või muude ravimpreparaatide.

Ainevahetuse Analüüs Profiil testimine on efektiivne patsiendi huve, nagu:

Tulemused ja soovitused Metaboolne Analüüs Profiil pakuvad juhiseid arendamiseks personaliseeritud täiendamine, kindlaks toitainete insufficiences mis võivad olla soodustav tegur keeruline krooniliste haigustega.

Metaboolne Analüüs Profiil aruanne võimaldab lihtsat tõlgendamise ja kliiniliselt vaidlustatavad tulemusi. See sisaldab Soovituslik täiendus Ajakava, mis pakub isikupärastatud soovitusi testi tulemused. Tõlgendus-At-pilgul aruande osa annab faktid seotud toitainete funktsiooni, põhjuste ja tüsistusi nende puudusi ja toidust.

Metaboolne Analüüs Profiil raporti liigitab katsetulemused suurteks metaboolse valdkondades:

Metaboolne Analüüs Profiil konkreetselt testib orgaaniliste hapete – ühendid uriiniga, mis on ainevahetuse kõrvalproduktide rakkude metabolismi.

  • Tasemed orgaanilisi happeid uriini võib viidata ebapiisav kofaktorit mikrotoitaineid kriitiliseks ensüümid, mis on vajalikud metaboolsete radade.
  • Düsfunktsionaalne või ebapiisava ensüümide aktiivsust ainevahetusteede võib produtseerida “ensümaatiline blokaad,” põhjustades orgaanilisi happeid eelnevale plokk koguneda ja voolamine uriiniga.
  • Traditsiooniliselt kuseteede orgaanilise happe hinnangu kasutatakse vastsündinute / pediaatria selgitada geneetiliste kaasasündinud ainevahetushäired, raskema sõltuvalt kraadi ja veatüüp.
  • Paljudel juhtudel geneetilise kaasasündinud vigadest ensümaatiline defekti võib kompenseerida suuri annuseid konkreetsete vitamiinide ja mineraalainete kofaktorid ja / või toidu sekkumised. Biokeemik dr Bruce Ames, ekspert DNA mutatsioone, selgitab selle mehhanismi:
    • “Meie analüüs ainevahetushaigus, mis mõjutab kofaktorit siduvad, eelkõige tänu polümorfset mutatsioonid võivad esitada uudne põhjendus suurtes annustes vitamiiniravi ehk sadu kordi normaalse toiduga viide omastamise (DRI) mõningatel juhtudel … Feeding suurtes annustes vitamiini tõstatab koe kofaktorit kontsentratsioonid ning seeläbi suurendab aktiivsust defektiga ensüüm. ” Ames, BN jt. Am J Clin. 2002 75: 616-58.
  • Eelduse, sekkumise kõrgema annuse toitainete kofaktorid võivad olla efektiivne ka juhtumeid vähenenud ensüümi aktiivsuse tingitud muudest põhjustest kui Frank kaasasündinud vigadest.
  • Metaboolsete radade võidakse kahjustada peenemate viise ühisel elustiili ja toitumistegurid nagu toitainete puudus, toksilisus, bakterite ülekasvamist või ravimi toimed ja võib olla seotud sümptomeid nagu:
    • meeleoluhäired
    • väsimus
    • Digestive Kaebused
    • Kaal küsimused / Toitumisjuhised
  • tuntud metaboolsete radade ja ensüümiga kofaktorit nõuetele, orgaanilisi happeid testimist Ainevahetuse Analüüs Profiil hindab:
    • Ainevahetuse Analüüs markerid
      • Malabsorbtsioon markerid
      • Bakteriaalne düsbioosi markerid
      • Pärm / seente düsbioosi markerid
    • Cellular Energia ja Mitokondri Metaboliidid
      • süsivesikute metabolism
      • energia Metabolism
      • Rasvhappe Metabolism
    • neurotransmitteri metaboliidid
    • vitamiin markerid
    • Toksiini & võõrutus markerid
    • türosiin Metabolism

Kroonilise sümptomid (eriti need, söömine standard American toitumine) või nende lihtsalt otsib üldist tervist või spordiga tulemuslikkuse optimeerimist võib kasu mõõtmiseks orgaanilised happed hinnata konkreetse metaboolsete radade ja biomarkerite ensüümi kofaktor vajadust.

Neist 5750 ensüümide kataloogitud on aprill 2016 ExPasy ENZYME andmebaasi peaaegu 32% (1817 ensüüme) nõuda vitamiini ja / või mineraalaine kofaktorid. Isegi “hea” toitumine, paljud inimesed ei suuda neid oluliste toitainetega.

2011. aasta andmete analüüs 2003-2006 National Health and Nutrition Eksami Küsitlused (NHANES) leidis, et märkimisväärne osa ameeriklasi (va võtta toidulisandeid) oli tavaline tarbimine palju toitaineid allpool hinnanguline keskmine nõue (EAR).

Näiteks aktiivse vormi püridoksiin (vitamiin B6) on kofaktor peaaegu 9% üle 1800 inimese ensüümid nõudes kofaktorina, mõjutades seotud radadele aminohape, glükoosi ja lipiidide metabolismi, samuti tootmiseks hemoglobiini ja aju neurotransmitterite. NHANES andmed näitasid, et täiskasvanute üle 19 (mitte võtta toidulisandeid), 15% oli tavaline tarbimine B6-vitamiini alla EAR. Tasemed orgaanilisi happeid seostatakse B6-sõltuva radasid võib viidata vajadusele B6 lisamisega.

Mis Advantage Do orgaanilised happed Profiles Pakkumise võrreldes teiste Diagnostika?

Dr Roger J. Williams (teadlane, kes avastas pantoteenhape, vitamiin B5) esimese vermis termini “biokeemiline individuaalsust” 1956 seletada geneetilise varieeruvuse haigusele, toitainete vajadused, ja narkootikumide reageerimisvõimet seas muidu näiliselt terved inimesed.

Kuigi tavade muutuvad traditsiooniline meditsiinilise mudeli praegu ei pane rõhku biokeemiline individuaalsust. Tavapärane kliinilises lähenemisviisi toitumisele seotud sümptomid ei ole tavaliselt hõlmavad kasutamist põhjalik toitumisalane testimise kaudu orgaanilised happed analüüsi.

Kui katsetamisel valige vitamiine tavaliselt hinnatakse vere teha kindlaks, kas tase on piisav, et täita toitainevajadust tervetel indiviididel. Orgaanilised happed testimise abivahendid identifitseerimisel tasakaalustamatuse organismis esinev mis võivad eelneda kõrvalekalded tavapäraste seerumi laboris paneelid.

Orgaanilised happed testimine võimaldab paremini mõista patsiendi biokeemiline individuaalsust, mis viib rohkem suunatud terapeutiline soovitusi.

Mida Arstid ja patsiendid ootavad orgaanilistest hapetest testimine?

Orgaanilised happed testimist Ainevahetuse Analüüs profiil võib näidata funktsionaalne vajadus antioksüdante, B-vitamiine, mineraalaineid, seedeelundite tugi, dieedimuutustele, võõrutus metülatsiooni toega või teiste ravimeetoditega.

Funktsionaalne toitumis- soovitustega pärinevate andmete raporti, identifitseerib peent puudulikkuse rakufunktsioonis mis ei pruugi olla ilmseks Standardseerum laboris järeltöötlus.

See võimaldab arstil teha kohandatud soovitusi, et parandada muu ravi ja suurendada patsientide üldise tervise tulemi ja võimet võidelda kroonilise haiguse. Soovi korral soovitatud täiendus ajakava soovitatav toitainete võib anda arst osana aruande.

Ainevahetuse Analüüs profiil Samuti on osa kõikehõlmavast NutrEval® FMV ja NutrEval® Plasma profiile. NutrEval on kombinatsioon toiteväärtust teste, et mitte ainult mõõdud orgaanilisi happeid, vaid ka aminohapped, asendamatud ja metaboolne rasvhappeid, oksüdatiivne stress märgiseid ning elementaarse markerid (mõlemad toitaine ja toksiliste elementide).

Allikas:

Haigused süsivesikute, rasvhapete ja Mitokondriaalne Metabolism – Basic Neurokeemia – NCBI Raamaturiiul

OAT: Mitochondrial, Carb & Fatty Acid Metabolites

Vead energia ainevahetuse põhjustada sügava häire funktsioon lihaste ja aju. Sellised vead võivad endast kujutada müopaatia, entsefalopaatia või entsefalomüopaatia. Kliinilised tunnused on kõige mõistetav mõistmiseks eelistatud Oksüdeeritav substraadid aju ja lihaste.

Lihase puhkeolekuks valdavalt kasutab rasvhappeid. Vahetus energiaallikas lihaskontraktsiooni on ATP, mis on kiiresti täiendada kulul kreatiinfosfaadist fosforüülimismenetlusega ADP kreatiinkinaasi. Treeningul mõõduka intensiivsusega, kütuse valik sõltub töö kestus.

Esialgu glükogeeni on peamine kütuse allikas; Pärast 5 või 10 min, veresuhkru muutub üha olulisemaks kütust. Nagu jätkub töö, rasvhappe suurema ärakasutamise ja pärast ligikaudu 4 tundi, lipiidid esmaseks energiaallikaks.

Ajal kõrge intensiivsusega treeningu juures peaaegu maksimaalne võimsus täiendavaid ATP on loodud anaeroobne lagunemine glükogeeni ja glükolüüsi.

Intensiivse kasutamise viiakse läbi sisuliselt anaeroobsetes tingimustes, arvestades kerge või mõõduka kasutamise kaasneb suurenenud verevool teostamisel lihaseid, hõlbustades substraati toimetamiseks ja soodustades aeroobse metabolismi. See kohanemise tuntakse “second-tuule” nähtus[1].

Aju poolt kasutatavat glükoosi peamiselt, piirkondlike variatsioonid ainevahetuse kiirust sõltuvalt vaimse või mootori tülesandega[1]. Nagu lihaste viivitamatu rakusisese energiaallikaks on ATP buttressed kreatiinfosfaadi kauplustes.

Glükogeeni annab väga vähe energiat reservi, sest aju kontsentratsioon glükogeeni on väga väike, ligikaudu vaid kümnendik summa lihastes leiduva grammi märgkaalu. Seega aju on peenelt kõikumiste suhtes tundlike vere glükoosisisaldust.

Liikumine glükoosi läbi hematoentsefaalbarjääri on hõlbustanud kandurvalguga, glükoosi transporteri (GLUT-1)[2]. Hõlbustavate glükoosi transporti tagab piisava aju glükoosi kontsentratsioon vajaduste rahuldamiseks aju ainevahetust normaalsetes tingimustes. Ajal nälga, aju kasutab vähe, kui üldse, rasvhappeid.

Kuid rasvhapped erineva pikkusega võib omastada ajus, kuna efektiivsus transporti läbi hematoentsefaalbarjääri on palju suurem lühi- või keskmise pikkusega ahelaga rasvhappeid kui pikaahelalised rasvhapped. Ketoonkehade esindavad eelistatud peaaju kütuseallikas ajal nälga kui glükoosi pakkumise piirdub[3] (Vt ptk. 31).

Defektne rasvhapete oksüdatsiooni seetõttu võivad mõjutada lihase otseselt blokeerides oksüdatsiooni käesoleva substraati ja aju kaudselt piirates maksa- ketogeneesi. Kõrgendatud ringlevate vabade rasvhapete võib olla ka otsest toksilist mõju aju, kuid täpsed mehhanismid see efekt on raskesti mõistetav (vt põsed. 35 ja 38).

Energeetilise metabolismi laialdaselt uuritud skeletilihastes ja mitmed ainevahetushäired on dokumenteeritud[1,4]. Võrdlemisi vähem teada metaboolse defektide peaaju energeetilise metabolismi. Selle põhjuseks võib olla lihaskoe on kättesaadav biokeemiline analüüs ja kuna teatud aju ensüümi defektid on surmav.

Allikas:

Mitu Mass isotopomeerses otsimise atsetüül-CoA Metabolism Langerdorff’i perfundeeritud Rat Hearts

OAT: Mitochondrial, Carb & Fatty Acid Metabolites

  1. Osakondades ‡ Toitumine ja
  2. §Biochemistry, Case Western Reserve University School of Medicine, Cleveland, Ohio 44106
  1. ↵1 Kellele kirjavahetus tuleks käsitleda: osakond Toitumine, Case Western Reserve University School of Medicine, 10900 Euclid Avenue W-G48, Cleveland, OH 44106. Tel .: 216-368-6548; Faks: 216-368-6560; Post: gxz35 {at} case.edu.

Taust: Mitmed substraadid genereerida atsetüül-CoA kasutatakse südame tsitraattsükli.

Tulemused: Me täheldasime ootamatu metaboliidi märgistamise südametes perfuseerida märgistatud pindadele.

Kokkuvõte: Kahekordne substraati tsükli liinile trioossuhkrud-fosfaadid, glükoos-6-fosfaat ja glükogeeni; metaboolse tunneli liinile püruvaatdehüdrogenaasi ja karnitiin atsetüültranferaasi.

Tähtsus: See metabolomic + mass isotopomeerses strateegiat saab kasutada paremini iseloomustavad sobivalt ainevahetuse haigus mudeleid.

Meil arenenud isotoopmeetodil tehnikat hinnata mitokondriaalse atsetüül-CoA käivet (≈citric happe flux) lahust voolutatakse rotisüdametel. Südamed ujutatakse puhvris, mis sisaldas tracer[13C2,2H3]atsetaat, mis moodustab M5 + M4 + M3 atsetüül-CoA.

Puhver võib sisaldada ka ühte või kahte märgistatud substraatide mis tekitavad M2 atsetüül-CoA (nt [13C6] glükoosi või[1,2-13C2]palmitaat) või / ja M1 atsetüül-CoA (nt [1-13C] octanoate).

Kogu atsetüül-CoA voolavus ja panuste kütuste atsetüül-CoA arvutatakse omastamine atsetaat märgise ja mass isotopomeerses jaotus atsetüül-CoA.

Seda meetodit rakendati mõõtmistele atsetüül-CoA käive erinevatel tingimustel (glükoosi ±-taat ± insuliini ± dikloroatsetaadiga).

Andmed näitavad (i) substraat jalgrattaga vahel glükogeeni ja glükoos-6-P vahel glükoos-6-P ja trioossuhkrud fosfaadid, (ii) vabanemist väikese liiaga atsetüülrühmadega nagu acetylcarnitine ja ketoonkehade, ning (iii) kanaliseerimiseks mitokondriaalse atsetüül-CoA alates püruvaatdehüdrogenaasi kuni karnitiin atsetüültranferaasi. Sellepärast Channelling märgistamise acetylcarnitine ja ketoonkehade vabaneva sobivalt pole proksisid märgistamise mitokondriaalse atsetüül-CoA.

Eesmärk Käesoleva projekti oli arendada ja ära kasutada multitracer tehnikat mõõta samal perfusiooni rotisüdametel; (I) kogukäibest mitokondriaalse atsetüül-CoA, st tsitraattsükli (CAC) 2 voogu ja (ii) absoluutne toetus (s) ühe või kahe allika atsetüül-CoA kõigi atsetüül-CoA voolavus.

Suhtelist panust glükoosi ja rasvhappe CAC saab mõõta kasutades paari märgistatud substraatide et genereerida ühe märgistatud (M1) 3 ja kahekordse märgistatud (M2) atsetüül-CoA. Sellised substraati paari võiks olla[13C6]glükoosi +[1-13C]palmitaat või[1-13C]glükoosi +[1,2-13C2]palmitaati.

M1 ja M2 rikastamist mitokondriaalse atsetüül-CoA saab mõõta kas (i) lõhestades tsitraate ATP-tsitraatlüaasi + CoA ja massi mõõtmiseks isotopomeerses jaotused (MID) atsetüül-CoA Selliselt tekitatud LC-MS / MS (1 ) või (ii), mõõtes märgistamist C-4 ja C-5 glutamaadi NMR (2).

Teisendada need suhtelist panust glükoosi ja rasvhappe atsetüül-CoA absoluutsele voogude atsetüül-CoA nendest substraatide nõuaks samaaegset jälgimist kõigi CAC voo detekteerimismärgise mis ei kattu häirima toodangule atsetüül-CoA glükoosist ja rasvhapete happed.

Kokku CAC voo on arvestanud perfuseerimiseks südamed kõrge kontsentratsioon[13C2]atsetaadi (2-11 mm) ja modelleerimine märgistamise mustrid CAC vaheühendid mõõdeti TMR (2, 3). Kuna südamel on kõrge aktiivsus atsetüül-CoA süntetaas (4, 5), niisugused protokollid mõjuta põlvkonna atsetüül-CoA teistele substraa[13C2]seguga.

Katsetes, näiteks[13C6]glükoosi +[1-13C]palmitaat, üks vajaks meetodit genereerima teadaoleva koguse atsetüül-CoA raskemad kui M2, ja see ainult mitokondrid.

Oletasime, et see on võimalik saavutada (i) infusioonietappi madalas kontsentratsioonis[13C2,2H3]atsetaadi (M5) lahust sissetuleva perfusioonilahusesse (skeem 1), (ii) mõõdetakse omastamine märgendühendiga (iii) mõõtes märgistamist koe atsetüül-CoA ja (iv) jagades omastamist[13C2,2H3]atsetaat poolt m5 rikastamine sobivalt atsetüül-CoA.

Kuna roti südame atsetüül-CoA süntetaas on olemas ainult mitokondrid (6, 7), omastamist[13C2,2H3]atsetaat peaks olema võrdne kogus M5 atsetüül-CoA moodustunud mitokondrid.

Me Oletatakse ka, et perfusioonid koos[13C6]glükoos, mõõtmiseks MID glükoos-6-P ja laktaadi lubaks arvutamisel panuste glükogeeni glükolüüsil CAC.

Lõpuks soovisime testida hüpoteese, et kontsentratsioonid ja märgistamist mustrid acetylcarnitine ja / või ketoonkehade vabaneva sobivalt võiks kasutada (i) mittedestruktiivsed proksisid märgistamise struktuuris mitokondriaalse atsetüül-CoA ja (ii) indeksina tootmiseks atsetüül-CoA, mis ületavad kiirust tsitraadi sünteesi. Viisime selle uuringu mittetöötavad Langerdorff’i perfundeeritud südamed, oodates, et laiendada selle töötamise südamepreparaadis.

KAVA 1.

Peamisteks allikateks ja saatuse atsetüül-CoA roti südamega. M5 atsetaat tracer on[13C2,2H3]seguga. Pange tähele, et süda aktiveerimist atsetaat vaid mitokondrite. BHB, (R) -β-hüdroksübutüraat; CPT, karnitiin -palmitoüül transferaasi süsteemi; TPS, trioossuhkrud fosfaate.

Täname Case Mouse Ainevahetus ja fenotüüpide Center (MMPC), mis aitab südamega perfusiooni eksperimente ja analüütiline uurimus.

R33DK070291National Institutes of Health

  • ↵ * Seda tööd toetas täielikult või osaliselt, National Institutes of Health Plaan Grant R33DK070291 ja Case Mouse Ainevahetus ja fenotüüpide Center (MMPC) Toetus U24DK76174 (H. B.). See töö toetas ka American Heart Association Grant 12GRNT12050453 (kuni G.-F. Z.) ja vahendite Cleveland Mt. Siinai Tervishoiu Foundation.
  • ↵3 Mass isotopomeerid tähistatakse kui M, M1, M2 … Mn, kus n on mitmeid raskeid aatomeid molekulis. Mol fraktsioonid mass isotopomeerid on määratud m, m1, m2 ….
  • ↵2 kasutatud lühendid on järgmised: CAC tsitraattsükli MID mass isotopomeerses jaotus CRat karnitiin atsetüültranferaasi G6P glükoosiks 6-fosfaat KAERATERAD 3-oksohappest-CoA transferaasi PDH püruvaatdehüdrogenaasi AcAc kloroatseetoatsetaadist.
  • Vastatud 9. detsember 2014.
  • Läbi sai 30. jaanuar 2015.

VIITED

Allikas:

OAT: Mitochondrial, Carb & Fatty Acid Metabolites

Orgaaniline hape test (kaer) on populaarsust kogunud paljude funktsionaalsete tervise eksperdid viimastel aastatel. Suur osa test vaatleb metaboliitide seotud energia tootmise, sealhulgas kaasatud süsivesikute ja rasvhapete metabolismi ja mitokondrite markerid. Aga kuidas informatiivne need markerid? Loe artiklit ja kohtunik ise.

Mis on orgaaniline hape Test? Orgaaniline hape Test, rahva tuntud kaer, mõõdab taset orgaaniliste ühendite uriinis, mis on organismis toodetav osana palju elulisi biokeemiliste radade. Seda kasutatakse, et kontrollida haruldaste kaasasündinud geneetilisi defekte ainevahetust, kõige sagedamini vastsündinutel. Defekt konkreetse raja mõjul võib kuhjumist või taseme vähenemist selle kõrvalprodukte.

Seega taseme mõõtmisel nende markerite aitab selgitada, mis ainevahetusprotsesse on blokeeritud või ohustatud .Kuid KAERATERAD on olnud järjest saadaval pricy otsest ja tarbija test soovitatavad palju alternatiivseid praktikud. Selles artiklis me murda teaduse taga testimine glükolüütilises tsükli, mitokondrite või Krebsi tsüklis, ja rasvhapete metaboliidid.

Loe edasi, et teada saada, millised on tegelikult väärt testing.Glycolysis on esimene samm glükoosi metabolismi (jaotus suhkrut) toodavad püruvaadi ja mõned energia (ATP). See samm toimub hapniku puudumisel. Püruvaat, siis siseneb mitokondrid ja muundub atsetüülkoensüümi, mis seejärel metaboliseerub Krebsi tsükli toota rohkem energiat hapniku juuresolekul.

Püroviinamarihape tekitatakse metabolismi süsivesikuid, valke ja rasvu. See on üks vaheühendite meie keha kasutab konverteerimiseks toidu energia[ 1 ].Apart oma rolli energia ainevahetust, püroviinamarihape on ka antioksüdant ja aitab vähendada põletikku[ 2 ].

Kui mitokondriaalse funktsioone alaneda madala hapnikuvarustuse või muud tegurid, glükolüüsi muutub peamiseks energiaallikaks, mis toodavad rohkem püruvaat. Liigne püruvaadi on pakotie kus see muundatakse oksaloatsetaadiks ja piimhape[ 3 ]. Seega püruvaadi tasemed on tavaliselt hinnati piimhappe taseme ja teised orgaanilised happed.

Püroviinamarihape katset võib öelda, kui on hapnikupuudus keha või küsimusi veresoontega. Piimhappe (laktaat) test siiski on usaldusväärsem ja palju sagedamini kasutatakse sel eesmärgil.

Need võivad suurendada püruvaadi tasemed: Biotiin (vitamiin B7) vaegus[ 9 ] Harva kaasasündinud häired – väga kõrge püruvaadi tase võib viidata kaasasündinud ainevahetushäired tingitud geneetilistest mutatsioonidest[ 16 , 17 , 18 ] Kuna püruvaadi tase võib suurendada erinevate põhjuste tagajärjel nad ei ole eriti informatiivne, kui neid ei kasutata, et kontrollida haruldaste ainevahetushäirete.

Kui teie tase on oluliselt tõusnud, töö oma arstiga, et teada saada, miks ja ravida aluseks cause.Elevated uriini püruvaadi taset kasutatakse ekraani haruldaste ainevahetushäirete. Nad võivad ka suurendada tänu erinevate teiste tervise küsimusi, mistõttu arst neid tõlgendada koos teiste teste, oma nähud, sümptomid ja haiguslugu.

Piimhape toodetakse keha rakud muudavad toiduainete (glükoosi) energiaks. See harjub ja eemaldati üsna tõhusalt, mistõttu veres ja uriinis tasemed on tavaliselt madala[ 19 , 20 ]. Suuremas koguses piimhapet toodetakse lihastes, ajus ja teistes kudedes, kui ei ole piisavalt hapnikku. See protsess on tuntud kui anaeroobne (= ilma hapnikuta) glükoosi metabolismi.

See juhtub sageli treeningu ajal, näiteks. Mõned soolebakterid ka toota piimhapet[ 19 , 20 ].Lactic acid saab jaotatud maksas ja neerudes ning võib koguneda organismis, kui see on toodetud kiiremini kui seda saab eemaldada[ 19 , 20 ].Lactic hapet liig võib pH alandamiseks veres ning põhjustada mida tuntakse laktatsidoosiga.

Piimhappe test sageli tellitud kui isik peab märke madala hapnikusisaldusega (hüpoksia) ja laktatsidoosiga nagu[ 19 ]: Õhupuudus kiire hingamine Kahvatus higistamine Iiveldus Lihasnõrkus Kõhuvalu Kõrgem piimhappe tase võib olla põhjustatud paljudest teguritest ja tingimused, sealhulgas: pingutavat füüsilist koormust – kui on tasakaalus hapniku transporti ja energiat nõudeid lihased[ 21 , 22 , 23 , 24 , 25 , 25 ] Gut bakteriaalse düsbioosi, leitud lühikese soole sündroomi ja pärast mao bypass operatsioon[ 32 , 33 , 34 , 35 , 36 , 37 ]

Tingimused, mis vähenes verevoolu või hapnikuvarustuse kudedes, näiteks verejookse (hemorraagia) ja aneemia[ 49 , 50 , 51 , 52 , 53 ] Kokkupuude toksiinid näiteks tsüaniid (leidub mõrumandlitest), süsinikmonooksiidi, tolueen või pestitsiidi fenaminosulf[ 56 , 57 , 58 , 59 , 60 ] Alkoholimürgistuse, sealhulgas allaneelamine etanool, propüleenglükool, etüleenglükool ja alkoholi sisaldavad tooted nagu käsihuuhde[ 61 , 62 , 35 , 63 , 64 ] Raskusest ja laktatsidoosi sümptomitest võib olla väga erinev sõltuvalt sellest, kumb metaboliseerimisteeks ei ole funktsionaalne ja võivad ulatuda tõsise neuroloogilise degeneratsiooni vastsündinutel (Leigh sündroom) ja varase surma suhteliselt normaalset elu episoodidega oksendamine, iiveldus ja üldine nõrkus[ 86 ].Kuna seal on nii palju erinevaid asju ja tingimused, mis võivad põhjustada suurenenud piimhape, mõned neist eluohtlik, see on väga oluline, et te ei püüa ise diagnoosida! Töö oma arsti, et teada saada, mida põhjustab kõrgenenud piimhappe ja kohelda aluseks condition.Following ravirežiimi arst määrab aitab vähendada piimhape tagasi normal.Elevated uriini piimhappe sisalduse kasutatakse ekraani haruldaste ainevahetushäirete. Samuti suureneb tänu erinevate teiste terviseprobleemide ja võivad põhjustada laktatsidoosi, mis on eluohtlik seisund. Töö oma arsti leida põhjus ja ravida mistahes haigust! Krebsi tsüklis (nimetatakse ka trikarboksülaat või TCA tsükkel) on keskus energia tootmine süsivesikute, rasvade ja valkude. tsükkel[…]

Loe rohkem selfhacked.com

Jagamine on hoolimine!

Allikas:

Novel reguleeriva rolle omega-3 rasvhapete ainevahetusteede a proteoomika läheneda

OAT: Mitochondrial, Carb & Fatty Acid Metabolites

Omega-3 polüküllastumata rasvhapped (n-3 PUFA) on näidanud, et leevendada sümptomeid ainevahetushäired, nagu südamehaigused, diabeet, rasvumine ja insuliiniresistentsuse. Mitmed oletatavat mehhanismid, mille n-3 PUFA esilekutsumiseks tervislikkusest on pakutud; aga on ikka puudu teadmisi valkude ja rajad, mis on reguleeritud n-3 PUFA.

Kasutades kahedimensionaalne polüakrüülamiidgeelelektroforeesi (2D-PAGE) ja vedelikkromatograafia-tandemmassispektomeetria (LC-MS / MS) analüüsi, uurisime mõju dieedid kõrge või madal n3 PUFA maksa- proteomic profiil C57BL / 6 hiiri .

Tulemused näitavad esmakordselt, et kõrged toidu n3 PUFA vähendatud ekspressiooni regucalcin, adenosiinkinaasi ja dehüdrogenaas.

Teiselt poolt, dieedid kõrge n3 PUFA suurenenud ekspressiooni apolipoproteiin AI, S-adenosüülmetioniin süntaas, fruktoos-1, 6-bisfosfataasi, ketohexokinase, malaatdehüdrogenaas, GTP-spetsiifilise suktsinüül CoA süntaasi, ornitiin aminotransferaas ja valgu isome A3.

Meie tulemused näitasid esmakordselt, et n-3 PUFA põhjustab muutusi mitmetes uudseid funktsionaalse osalevaid valke reguleerides lipiidide, süsivesikute, ühesüsinikuaatomilise, tsitraattsükli ja valkude metabolismis, mis viitab integreeritud regulatsioon Ainevahetusradade. Need uudsed valgud on potentsiaalsed sihtmärgid arendada ravistrateegiate vastu ainevahetushäired.

Toitainete on võime suhelda ja moduleerida molekulaarsed mehhanismid vastutavad organismi füsioloogilistes funktsioonides[1]. Viimastel aastakümnetel, kui tähtis on toitainete, eriti omega (n) -3 polüküllastamata rasvhappeid (PUFA), in etioloogia krooniliste haiguste on saanud palju tähelepanu[2-4].

N-3 PUFA on osutunud kasulikuks mitmesuguste haigusseisundite nagu ateroskleroos[5], ülekaalulisus[6]Ja rasvumus indutseeritud insuliiniresistentsuse maksa[7,8].

Südame-kaitsvad toimed n3 PUFA on kõige erineb; n3 PUFA parandada südame-veresoonkonna tervise peamiselt vähendades plasma triglütseriidide (TG) taset[9], Sümptomite leevendamisel arütmia[10] ja põletiku[11]. N-3 PUFA cardio-kaitsev toime sõltub peamiselt selle annust[12-14].

American Heart Association on soovitanud 1000 mg / d raviks ning südameveresoonkonna haigused (CVDs)[15]. Uuringud on ka näidanud, et n-3 PUFA stimuleerida lihaste glükogeeni sünteesi[16] ja moduleerivad antioksüdant ensüümi aktiivsuse, näiteks superoksiiddismutaas ja katalaasi in maksad diabeediga rottide toideti kõrge rasvasisaldusega dieedil[17].

Vastupidisel juhul, dieedid kõrge n-6 PUFA peetakse suurendavad riski põletikuliste[18] ja oksüdatiivne stress radu[19], Mida segavate faktorite enamiku ainevahetushaigused. Mitmed mehhanismid on ettepanek, mis n-3 ja n-6 PUFA avaldavad oma bioloogilisi toimeid[20,21]Aga kättesaadava teabe on napp, veenvad ja ei ole selgesõnaliselt määratleda valkude ja juhteteedele tegevuse PUFA.

N-3 ja n-6 PUFA moodustada bioaktiivsete mediaatorite mis toimivad erineva retseptorid ja valgud organismis[22]. Valgud on tähtsad mediaatorite bioloogilisi toimeid kogu eluslooduses rakulise ühikut ning proteoomis koosneb kõigist ekspresseeritud valkude genoomi poolt kodeeritud kärgsüsteemi[23].

Analüüsi toitained vahendatud muutusi proteomic profiil võib viia uudsete valkude tuvastamiseks regulatsioonis osalevate Ainevahetusradade[24]. Käesolevas uuringus me kasutasime 2D-PAGE seostati LC-MS / MS mõju uurimiseks n-3 PUFA reguleerimise kohta maksa- proteomic profiil C57BL / 6 hiiri.

Meie tulemused näitavad esmakordselt, et toidu kaudu n3 PUFA vähendatud ekspressiooni regucalcin, võtmemolekul kaasatud ainevahetushäired, kaasa arvatud diabeet ja lipiidide ainevahetust.

Me ka aru esmakordselt, et n-3 PUFA reguleerida mitmeid valke regulatsioonis osalevate Rasvaainevahetuse, ühesüsinikuaatomilise metabolismi, süsivesikud, tsitraattsükli ja valkude sünteesi.

Aluse poolsünteetilised toitumine spetsiaalselt lubada kontrolli rasvamäär 20% w / w saadi pulbristatud koos rasvaallikast jätta (MP Biomedicals, OH, USA).

Menhaden õli (Sigma-Aldrich, MO, USA); searasva, saflooriõli ja ekstra neitsioliiviõlil valmistamiseks kasutati kahte erinevat õli segu, mis sisaldas 10% (kõrge n-3) ja 2% (madal n-3) n-3 PUFA üldrasvasisalduse ning mida on eelnevalt avaldatud[25]. Kogus küllastunud rasvhapete (RLS), monoküllastumata rasvhappeid (MUFAga) ja kogu PUFA hoiti konstantsena.

Kaks eksperimentaalse dieedid erinesid vaid n-3 PUFA summa; kõrge n3 PUFA toit sisaldab 10% n-3 PUFA samas madala n3 PUFA toit sisaldab 2% n3 PUFA kogu toidurasvade. Gaas-vedelikkromatograafia (GLC) määramiseks kasutati rasvhappe toidusedeli, mis on varem avaldatud[25].

Seitse nädalat C57BL / 6 hiired osteti Charles River Laboratories (MA, USA). Loomad paigutati kontrollitud temperatuuriga loomaruum koos 12 tunnise valguse-pimeduse tsüklit. Hiiri hoiti üks nädal aklimatiseerumisperiood regulaarselt söögidieeti (Prolab RMH 3000) osteti PMI toitumine (MO, USA).

Emased hiired pandi üks kahest eksperimentaalse dieetide (madal või kõrge n3 PUFA dieedid) 2 nädala jooksul enne paaritumist ja nad jätkasid määratud dieedid kogu tiinuse, laktatsiooni ja kuni võõrutamist. Võõrutamisel, meeste ja naiste järglastel jätkasid ema toidust neli kuud.

Loomad olid varustatud vee ja värske ad libitum, ülepäeviti. Kehakaal registreeriti üks kord nädalas, ja dieedist registreeriti ülepäeviti. Olulisi erinevusi ei täheldatud nii kehakaalu ja dieedist (andmeid ei ole toodud).

Lõpus katseperioodi, loomad (n = 4) näljutati öö ja veri koguti südame punktsiooni sisaldavasse tuubi EDTA (4,5 mM, pH 7,4) eraldi plasmas. Maksadele külmutati koheselt vedelas lämmastikus ja säilitati -80 ° C juures kuni edasise kasutamiseni. Institutsionaalne loomakaitsekomitee Memorial University heaks kõik katsed kooskõlas suuniste Kanada nõukogu for Animal Care.

Maksa lipiidid kaevandatud vastavalt meie varem avaldatud meetod[26]Ning analüüsiti TG kontsentratsiooni kasutamisel TG katsekomplektist (# 236-60, Sekisui Diagnostics, P.E.I Inc., Kanada).

Plasmaproove määramiseks kasutati esterdamata rasvhapete (NEFA) kasutades komplekti (# 993-35191, Wako Chemicals Inc., USA).

Tühjakõhu veresuhkru kontsentratsioone mõõdeti ajal ohverdamist kasutades kaubanduslikult saadavat glükomeetriga (Lifescan Inc. CA, USA) pärast snipping saba.

Maksafunktsiooni KAERATERAD aktiivsust testiti vastavalt meetodile Herzfeld ja Knox[27] ja valgu kontsentratsioon maksas ekstrakt määramiseks kasutati biureeditest[28]. Kaera ensüümi aktiivsuse standardiseeriti Lineaarsusele ajas valgukontsentratsioonil ja väljendati pmol / min / g maksa.

Maksaproovid (n = 4 ravirühma kohta) (30 mg iga tablett) homogeeniti 40 mM Tris profileerida hüdrofiilne proteoomis lahustub vesipuhverlahusega. Eraldamine supernatant viidi läbi pärast tsentrifuugimist (3000 rpm juures 3 minutit temperatuuril 4 ° C). Valgu kontsentratsioon määrati Bradfordi meetodil[29].

Alikvoot 800 ug koguvalgu lisati 10 ml eeltäidetud jahutatud 85% atsetooni / 0,07% ditiotreitool (DTT) -20 ° C juures lõppkontsentratsioonini 80% atsetooni; pesemis- ja tsentrifuugimise etapid viidi korratakse kuus korda, et eemaldada kõik vees lahustuvad ained ja puhaste valgu sade kuivatati lämmastiku gaasi.

Pesemine mitut atsetooni sademete padrunit parandab Isoelektriline fokuseerimine (IEF) oluliselt[30]. Puhastatud valguproovis katkestati otse rehüdratatsioonist puhvrit (7,0 M uurea 2.

0 M tiokarbamiidvaigud, 4% CHAPS, 30 mM DTT, 1% Bio-Rad 3-10 ampholyte, broomfenoolsinise) lõpliku mahuga 500 ui proovi kohta ning tsentrifuugiti 100000 xg 30 min enne üleöö laadimine toimub rehüdratatsioonist immobiliseeritud pH tõusu (hüviste) ribadeks.

IES viidi läbi koos Ettan IPGphor II süsteemi ja Kollektor salve (GE Healthcare, Piscataway, NJ, USA), kasutades 24 cm ReadyStrip IPG (Bio-Rad, Mississauga, Ontario Kass. No.163-2042). Ribad keskendunud kokku 100 KVH enne töötab teises mõõtme geele. IPG ribadeks inkubeeriti 10 min tasakaalus puhvrit (1,5 M Tris-HCl, pH 8.

8 naatriumdodetsüülsulfaadi (SDS), uurea, glütserool, broomfenoolsinise) 1% DTT järgnes 10 min samas puhvris, mis sisaldas 2,5% iodoacetamide. Teise mõõtme Tris-glütsiini SDS-PAGE viidi läbi, kasutades 20 cm gradient 10-20% akrüülamiidgeelidel mujal kirjeldatu kasutades Ettan DALT kuus (GE Healthcare) aparaadi[31]. Valgu üldkogusest tuvastati värvimisega üleöö 0,15% w / v Coomassie sinisega R250; mittevärvunud 1 tund 25% v / v etanool, 7% v / v äädikhapet.

Pilte kokku valgumustrit 2D-geelid püüti video pildistamine kasutades ImageScanner III (LABScan 6.0 tarkvara, GE Healthcare, Life Sciences, Rootsi). Siis kasutatakse spetsialiseeritud tarkvara, Progenesis Samespots, 3. versioon

1 (Mittelineaarsed Dynamics, Newcastle upon Tyne, UK) vastavusse viimiseks ja kvantifitseerida valgutäppide alates kata 2D-gel pilte. Kasutamine identsed koht piirid kõigis geelid, tausta lahutamist ja normaliseerimist kõigi värvumisintensiivsus iga geel tagada võrreldavad andmed kõigi geelid koos Progenesis Samespots tarkvara.

Iga koht oli käsitsi hinnati 3D pildi kuvamise jätta esemeid (turris või ebakorrapärase kujuga laigud, lõhenenud kohad jne). Tuvastatud tõeline laigud, pilt taasühitamise, müra filtreerimine ja laigud segmenteerimine viidi läbi vaikesäte[32].

Automaatne analüüs viidi läbi kõik joondatud pilte kasutades analüüsi nõustaja. Korrastatud pildid rühmitati kõrge ja madala n3 PUFA rühm ning statistiliselt pingerea laigud hinnati.

Väljalõigatud valgutäppide 1,5 silikooniga polüpropüleenviaale pesti 3 korda 100 mM ammooniumbikarbonaat / atsetonitriil (NH4HCO3 / ACN) ja valgud redutseerida 10 mM DTT 100 mM NH4HCO3 30 minutit temperatuuril 56 ° C[33].

Pärast jahutamist toatemperatuurini, liigne DTT lahus eemaldati ning proove alkülitakse 55 mM iodoacetamide 100 mM NH4HCO3 30 minutit toatemperatuuril pimedas. Liigne iodoacetamide lahus eemaldati ning geeliosadest pesti veel kord 100 mM NH4HCO3 / ACN, 1: 1 v / v.

Proovid olid dehüdreeritud 20 minutit ACN, hiljem rehüdraaditud 12,5 ng / ul sekveneerimisklassi muundatud Trüpsiin puhvris (100 mM NH4HCO3, 10% ACN, 2,5 mM CaCl2) 30-40 min jääl[34]. Proove inkubeeriti temperatuuril 37 ° C üle öö.

Pärast jahutamist toatemperatuurini, 50 ui 5% sipelghapet (FA) lisati proove loksutati ja tsentrifuugiti 6000 rpm juures 2 minutit ja selge supernatant koguti värske silikooniga torudesse. Ekstraktsioon korrati kasutades 1% FA, 5% ACN; 1% FA, 60% ACN; 1% FA ja 99% ACN. Ühendatud ekstraktid kuivatati vaakumis.

Suhe peptiidkaardistamisega ja killustumine analüüsi maatriksi laserdesorptsioonionisatsioonlennuaja / ionisatsiooni time-of-flight massispektromeetria (MALDI TOF MS), millest igaüks kontsentreeritud peptiidi ekstrakt puhastatakse koos μC18-ziptip (Millipore, Billerica, MA) pipetiotsakuga.

Seondunud peptiidide ziptip elueeriti elutsooni lahusega (50% ACN 5% FA, 2,5-dihüdroksübensoehappest (DHB 10 mg / 67 ui). Proovi määrimist kasutasime me kuivatati tilga meetodil[35]. 4 ui proovi deponeeriti ndal kaheks tilkade 2 ui iga.

Kalibreerimine tehti esimene väliselt saada 10-20 ppm täpsusest tuntud peptiidi standarditega. Sisemine kalibreerimine viidi läbi tuntud maatriksi klastris signaale ja Trüptiliste autolüs peptiidi signaale saavutada mass täpsus on väiksem kui 100 ppm.

Üksik MS m / z illustreeriv 600-3000 ja MS / MS analüüs viidi läbi kasutades QSTAR XL hübriidi quadrupole / lennuaja massispektromeeter varustatud o-MALDI ioonallikaga (Applied Biosystems, Foster City, CA), mis asub Memorial Ülikooli ja proteoomika (GAP) rajatis.

Instrumenti ilmutab mass lahutusvõime 10 000 Täislaiusega poole maksimaalsest ja täpsuse mõne millidaltons on TOF spekter nii MS ja MS / MS olekutes. Lammutamismaht nimekirja loodi Applied Biosystems Andmed Explorer alates tasandamata algandmed spektri pärast de-isotoping.

Monoisotoopsed m / z väärtused tuntud maatriksi klastris piigid ja signaale trüpsiini autolüs peptiide või tuntud pärinevaid peptiide keratins[36] olid käsitsi eemaldada seda nimekirja enne, kui see oli kopeeritud päringu lõik maskott Peptide Mass sõrmejälg Internetis sisenemise vormi http://www.matrixscience.com[37].

Järgmised seaded kohaldati online andmebaasi otsingut: Database = NCBInr 20111022 (15670863 järjestused; 5387755057 jäägid); Taxonomy = musculus; Ensüüm = Trüpsiin (maksimaalselt 2 vastamata lõhestumisjoontele); Fikseeritud modifikatsioone = karbamidometüül- (C); Muutuv modifikatsioone = atsetüül (Protein N perspektiivis) ja oksüdeerumine (M); Peptiidi tolerantsuse = ± 100 ppm; Mass väärtused = MH + (monoisotoopsele). Ainult tõenäosus hinded, lk

Allikas:

OAT: Mitochondrial, Carb & Fatty Acid Metabolites

  1. Lopaschuk G. D., Rebeyka, I. M. & Allard, M. F. Ainevahetuse modulatsiooni: vahendit lappima murtud südant. Ringlusse 105, 140-142 (2002).

    • CAS
    • artikkel
    • Google Scholar
  2. Nagoshi, T., Yoshimura, M., M. C. Rosano, Lopaschuk G. D. & Mochizuki, S. optimeerimine Südame Metabolism südamepuudulikkus. Pharm Des 17, 3846-3853, doi: 10,2174 / 138161211798357773 (2011).

    • CAS
    • artikkel
    • PubMed
    • PubMed Central
    • Google Scholar
  3. Neubauer, S. südamepuudulikkust-mootorikütusena. N. Engl 356, 1140-1151 (2007).

  4. Kantor, P. F., Lucien, A., Kozak, R. & Lopaschuk, G. D. Angiinivastased Drug Trimetazidine Muutused Südame Energia Metabolism Alates rasvhapete oksüdatsiooni glükoosiks oksüdeerumine pärssides Mitokondriaalne pikaahelaliste 3-ketoatsüül koensüümA Thiolase. Circ Res 86, 580-588, doi: 10,1161 / 01.res.86.5.580 (2000).

    • CAS
    • artikkel
    • PubMed
    • Google Scholar
  5. Carvajal, K. & Moreno-Sanchez, R. Heart ainevahetushäired kardiovaskulaarsete haiguste raviks. Arch Med Res 34, 89-99 (2003).

    • CAS
    • artikkel
    • Google Scholar
  6. Malloy, C. R., Jones, J. G., Jeffrey, F. M., Jessen, M. E. & Sherry, A. D. Contribution erinevate pindadega kokku tsitraattsükli voogu ja] anapleroosi määratuna 13C isotopomeerses analüüsi ja O2 tarbimine sobivalt. MAGMA 4, 35-46, DOI: 10,1007 / bf01759778 (1996).

    • CAS
    • artikkel
    • PubMed
    • Google Scholar
  7. Taegtmeyer, H., Beauloye, C., Harmancey, R. & Hue, L. Insuliinresistentsus kaitseb südant kütuse ülekoormuse vaegreguleeritava metaboolse riikides. Am J Physiol Heart Circ Physiol 305, H1693-H1697 (2013).

    • CAS
    • artikkel
    • Google Scholar
  8. Taegtmeyer, H. Kuus pimedat avastada elevant: aspektide kütuse ainevahetust ja kontrolli trikarboksüülhappetsükli aktiivsuse südamelihas. Basic Res Cardiol 79, 322-336 (1984).

    • CAS
    • artikkel
    • Google Scholar
  9. Barrett, A. M. Juhuslikult mõjutavad tegurid Kontsentratsioon vabade rasvhapete rottide plasmas. Brit J Pharm Chemoth 22, 577-584 (1964).

    • CAS
    • artikkel
    • Google Scholar
  10. Kraupp, O., Adlerkas., L., Niessner, H. & Plank, B. Effects of Toitainevaba ja ägeda ja kroonilise alloksaani Diabetes kohta Südamelihase põhimik tasemetel ja maksaglükogeeni Rat in vivo. Eur J Biochem 2, 197-214 (1967).

    • CAS
    • artikkel
    • Google Scholar
  11. Olson, R. E. Effect pürovaati ja kloroatseetoatsetaadist kohta Metabolism Rasvhapete LÄBIVOOLUTATUD Rat Heart. Nature 195, 597-599, doi: 10,1038 / 195597b0 (1962).

    • CAS
    • ADS
    • artikkel
    • PubMed
    • Google Scholar
  12. Bassenge, E. jt. Mõju ketokehade südame Metabolism. Am J Physiol 208, 162-168 (1965).

    • CAS
    • artikkel
    • Google Scholar

Allikas:

Rate article